是否进口否	产地上海
级别色谱纯	含量98％
品牌DM	用途范围科研
产品名称伞形花内酯	是否危险化学品否
货号 DM-0099	产品规格20mg
CAS 93-35-6

伞形花内酯
样品收集、处理及保存方法
1.  血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2.  血浆：edta、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。
3.  细胞上清液：3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4.  组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。
5.  保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
伞形花内酯
常用标签包括有flag、myc、ha、his、gst、gfp、mbp等。
flag标签系统利用一个短的亲水性八氨基酸肽（dykddddk）融合到目标蛋白；其纯化条件是非变性的，因此可以纯化所有有活性的融合蛋白。
his标签是由6个组氨酸（his-his-his-his-his-his）组成的短肽，专门设计用于重组蛋白的吸附纯化。由于分子量小，且较容易分离和纯化，是目前使用***广泛的一种。
gst标签体系具有蛋白表达率高，表达产物纯化方便，利于gst抗体制备的特点。gst融合蛋白在水溶液中可溶，可从细菌裂解液中提取，在不变性的条件下通过亲和层析得到。
gfp或其突变体egfp等广泛用于基因表达效率的检测，以及和目的蛋白融合表达用于检测目的蛋白的表达和分别。gfp抗体不经可以检测gfp或其适当的突变体，也可以检测和gfp或其适当的突变体融合表达蛋白的表达、细胞内定位，以及纯化、定性或定量检测gfp融合表达蛋白等。
myc标签（序列为：eqkliseedl）已成功应用于wb杂交技术、免疫沉淀ip和流式细胞术中。因此可用于检测重组蛋白在细菌、酵母、昆虫细胞和哺乳细胞中的表达情况。myc重组蛋白质可通过偶联myc标签抗体到活化的琼脂糖上而进行亲和纯化。但myc重组蛋白的低ph洗脱条件往往会降低蛋白质的活力，因此myc标签系统广泛应用于检测但很少用于纯化。
ha标签系统利用一个ha（influenza hemagglutintin epitope:ypydvpdya）短肽融合到目标蛋白。ha标签可位于蛋白质的c端或n端，该系统已广泛应用于多种细胞类型，相应的ha标签抗体也被广泛运用。
mbp标签蛋白大小为40kda，由大肠杆菌k12的male基因编码。mbp可增加在细菌中过量表达的融合蛋白的溶解性，尤其是真核蛋白。如果蛋白在细菌中表达，mbp可以融合在蛋白的n端或c端。可用mbp抗体或表达的目的蛋白特异性抗体检测mbp标签标记的重组蛋白。
其余标签抗体还有v5、gfp、rfp、β-actin、β-tubulin、gapdh、erk1、au1、avi、b、cbp、ddddk、e、e2、glu-glu、hat、hpc4、hsv、kt3、klh、mat、protein a、s、s1、snap、srt、nwshpqfek、sumo、t7、tag-100、tap、trx、ty1、tf、universal、vsv-g等，但应用相对较少。
伞形花内酯
操作步骤
1.  从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2.  设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μl；
3.  样本孔先加待测样本10μl，再加样本稀释液40μl；空白孔不加。
4.  除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（hrp）标记的检测抗体100μl，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5.  弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。
6.  每孔加入底物a、b各50μl，37℃避光孵育15min。
7.  每孔加入终止液50μl，15min内，在450nm波长处测定各孔的od值。

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